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豬肺炎支原體抗原(MP-Ag)ELISA試劑盒定性

簡(jiǎn)要描述：軒澤康生物提供豬肺炎支原體抗原(MP-Ag)ELISA試劑盒定性免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，快速檢測(cè)一周內(nèi)出結(jié)果。我司ELISA檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品種類齊全，為您提供全面技術(shù)咨詢服務(wù)和產(chǎn)品說(shuō)明書。試劑盒有質(zhì)量問(wèn)題我們無(wú)條件退換。歡迎咨詢、訂購(gòu)!

更新日期：2025-07-22
訪問(wèn) 量：659

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產(chǎn)品介紹

品牌	軒澤康	規(guī)格	96T,48T
供貨周期	現(xiàn)貨	主要用途	僅用于科學(xué)研究,不得用于臨床
應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥	保質(zhì)期	6個(gè)月
保存條件	2-8℃	檢測(cè)方法	雙抗一步夾心法
實(shí)驗(yàn)儀器	酶標(biāo)儀	樣本類型	血清、血漿、細(xì)胞上清液等
特色服務(wù)	免費(fèi)代測(cè)

豬肺炎支原體抗原(MP-Ag)ELISA試劑盒定性常見樣本處理及要求：

【血清樣本】：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置 2 小時(shí)或 4℃過(guò)夜，然后 1000×g 離心 20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注意事項(xiàng)：收集血液樣本應(yīng)避免溶血，因?yàn)榧t細(xì)胞在溶解時(shí)會(huì)釋放具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，這種情況下，ELISA實(shí)驗(yàn)中將會(huì)出現(xiàn)非特異性顯色反應(yīng)，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確，出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。另外，樣本還應(yīng)避免細(xì)菌污染，因?yàn)榧?xì)菌可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。

【血漿樣本】：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注意事項(xiàng)：檢測(cè)前請(qǐng)仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說(shuō)明書，查看該試劑盒針對(duì)抗凝劑是否有特殊要求。

【細(xì)胞培養(yǎng)物上清】：請(qǐng)1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

【樣品保存】：樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可保存于4℃，若不能及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次使用量分裝，凍存于-20℃（1個(gè)月內(nèi)檢測(cè)），或-80℃（6個(gè)月內(nèi)檢測(cè)），避免反復(fù)凍融，標(biāo)本溶血會(huì)影響最后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

檢測(cè)原理：試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被肺炎支原體（MP）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），與CUT OFF值相比較，從而判定標(biāo)本中肺炎支原體抗原（MP-Ag）的存在與否。

豬肺炎支原體抗原(MP-Ag)ELISA試劑盒定性組成及其配置：

名稱	96孔配置	48孔配置	品牌
微孔酶標(biāo)板	12孔×8條	12孔×4條	軒澤康
陰性對(duì)照	0.5mL	軒澤康	軒澤康
陽(yáng)性對(duì)照	0.5mL	0.5mL	軒澤康
檢測(cè)抗體-HRP	10mL	5mL	軒澤康
20×洗滌緩沖液	25mL	15mL	按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋
底物A	6mL	3mL	軒澤康
底物B	6mL	3mL	軒澤康
終止液	6mL	3mL	軒澤康
封板膜	2張	2張	軒澤康
說(shuō)明書	1份	1份	軒澤康
自封袋	1個(gè)	1個(gè)	軒澤康

操作步驟：

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔，陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各50μL；

3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加稀釋液40μL；

4. 隨后陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

ELISA試劑盒常見問(wèn)題解答：

1. 問(wèn)：96T可以檢測(cè)多少個(gè)樣本？48T可以檢測(cè)多少個(gè)樣本？

上海軒澤康生物解答：96T ELISA試劑盒可檢測(cè)90個(gè)樣本，留6個(gè)孔做標(biāo)準(zhǔn)曲線；48T ELISA試劑盒可檢測(cè)42個(gè)樣本。

2. 問(wèn)：能否使用自己的稀釋液或者緩沖液？

上海軒澤康生物解答：每個(gè)試劑盒中都含有按配方配置的與特異性樣品種屬相配套的稀釋液，以確保待檢測(cè)的樣品被正確稀釋。具體請(qǐng)參看說(shuō)明書

3. 問(wèn)：ELISA檢測(cè)試劑盒空白對(duì)照是什么意思？

上海軒澤康生物答：不加樣本，不加稀釋液，不加酶標(biāo)試劑。其他都可以加。

4. 問(wèn)：我是按照實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行測(cè)定的但是沒(méi)有任何信號(hào)，這是為什么？

上海軒澤康生物答：對(duì)于使用HRP底物的比色測(cè)定，終止液的加入會(huì)使底物變色。而說(shuō)明書推薦的波長(zhǎng)就是最適波長(zhǎng)。通過(guò)輕拍酶標(biāo)板的邊緣充分混合孔內(nèi)試劑，加入終止液時(shí)顏色由藍(lán)變黃。如果加終止液之前孔內(nèi)試劑沒(méi)有混合，則底物顏色變綠。也可能加入試劑的順序錯(cuò)誤。加入底物溶液以后不要清洗酶標(biāo)板，在連續(xù)稀釋時(shí)確定已經(jīng)加入標(biāo)準(zhǔn)品。如果底物系統(tǒng)中有兩個(gè)成份必須混合均勻。同時(shí)需確保酶標(biāo)儀的使用和操作正確。確定試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、樣品都正確配置并按照說(shuō)明滴加無(wú)誤。

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